I staden Monstropolis bor monster i alla storlekar, kulörer och med alla utseenden. Deras främsta energikälla är mänskliga skrik som förädlas i Monsters, Inc., den mest framgångsrika förädlingsfabriken i hela monstervärlden. I fabriken arbetar en grupp med de bästa och mest skräckinjagande monstren som har som huvuduppgift att nattetid gör entré i den mänskliga världen för att skrämma barn och samla på deras skrik. Monstren tror dock att barnen är giftiga och att det är förenat med livsfara med direktkontakt, vilket försvårar uppdraget. Monsters, Inc:s VD Henry J. Waternoose inser att fabriken står inför bistrare tider eftersom dagens barn inte är lika lättskrämda som förr, och fabriken lider brist på skrik att förädla.